C18色譜柱選擇技巧

C18色譜柱（十八烷基硅膠柱）是液相色譜中最常用的反相柱，廣泛應用于醫藥、食品、環境、化工等行業的成分分析、純度檢測及雜質分離。市面上C18柱種類繁多，選擇合適的C18柱對于分離效率、穩定性、重現性及方法開發至關重要。下面從關鍵參數、應用場景、選擇建議、常見品牌等方面系統說明。

一、C18色譜柱選擇需關注的主要參數

1. 硅膠基質（粒徑、純度、孔徑）

粒徑（Particle size）：常見有5 μm、3 μm、2.6 μm、1.7 μm。粒徑越小，分辨率越高但柱壓越大。

端基覆蓋（End-capping）：未端基覆蓋的柱子硅醇基活性大，容易出現拖尾尤其對堿性化合物不利。優選充分端基處理的柱子。

孔徑（Pore size）：常規為80–120 ?（適合小分子），300 ? 適合蛋白、肽等大分子。

2. 碳載量與鍵合方式

碳載量（%C）：決定疏水性，碳載量高保留能力強，一般8%–22%。樣品極性大選低載量，回收速率快；疏水性強選高載量柱。

鍵合方式：單鍵合/雙鍵合，有些柱子有特殊工藝，如雙端基保護，更耐酸堿或高溫。

3. 柱規尺寸

柱長（如100、150 mm）、內徑（如4.6、2.1 mm）決定理論塔板數與通量，分析型與半制備型選取不同。

一般標準柱為4.6×250 mm或4.6×150 mm，UPLC小柱為2.1×50 mm等。

4. 柱的pH適應范圍

部分C18柱只能用在pH 2-8范圍，有些耐pH 1-12，需看樣品體系、流動相設定。

5. 柱床均勻性&批次一致性

優質品牌柱子具備高重現性，批次間性能差異很小，對定量分析尤為重要。