標(biāo)準(zhǔn)曲線理論基礎(chǔ)知識(shí)

標(biāo)準(zhǔn)曲線在分析檢測(cè)中扮演著至關(guān)重要的角色，以下是關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的基礎(chǔ)理論知識(shí)：

一、標(biāo)準(zhǔn)曲線的定義

分析檢測(cè)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線是指一系列已知含量（濃度/量）的物質(zhì)與儀器響應(yīng)/信號(hào)之間的關(guān)系。數(shù)學(xué)上，這種關(guān)系可以通過(guò)曲線方程來(lái)表示；圖形上，則呈現(xiàn)為標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的是可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測(cè)物質(zhì)的含量。

二、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作要求

按GB/T 22554-2010《基于標(biāo)準(zhǔn)樣品的線性校準(zhǔn)》推薦，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，應(yīng)遵循以下要求：

濃度范圍：標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度范圍應(yīng)覆蓋正常操作條件下的被測(cè)量范圍。

組分一致性：標(biāo)準(zhǔn)樣品的組分應(yīng)盡量與被測(cè)樣品組分一致，以減少基體干擾。

濃度分布：標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度值應(yīng)等距離的分布在被測(cè)量范圍內(nèi)，以確保曲線的準(zhǔn)確性和可靠性。

標(biāo)準(zhǔn)樣品個(gè)數(shù)：標(biāo)準(zhǔn)樣品的個(gè)數(shù)至少應(yīng)有3個(gè)濃度，通常建議更多，以提高擬合的準(zhǔn)確性和可靠性。

重復(fù)性：每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)至少重復(fù)2次，這個(gè)重復(fù)是指從稀釋開(kāi)始，以確保數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

三、標(biāo)準(zhǔn)曲線的核心問(wèn)題

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或標(biāo)準(zhǔn)品：需要找到確切濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或標(biāo)準(zhǔn)品。

基體匹配：標(biāo)準(zhǔn)系列和待測(cè)物質(zhì)一定要有相同和一致的基體，以減少樣品基體對(duì)儀器響應(yīng)的干擾。

四、標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn)

標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn)是實(shí)際操作中的難點(diǎn)，主要包括以下方面：

精密度檢驗(yàn)：考察試驗(yàn)點(diǎn)在擬合直線方程左右的分布情況，需用F檢驗(yàn)，P<0.05作為線性檢驗(yàn)合格的標(biāo)準(zhǔn)。

截距檢驗(yàn)和斜率檢驗(yàn)：分別考察Y=a+bX中a和b與0的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。a與0有差別說(shuō)明有試劑空白或系統(tǒng)誤差，而b若與0無(wú)差別說(shuō)明儀器的靈敏度達(dá)不到分析要求。

決定系數(shù)：是相關(guān)系數(shù)的平方，提示回歸方程所解釋X對(duì)Y變化占Y變量的比值。

失擬檢驗(yàn)：看曲線擬合后剩下殘差與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)本身隨機(jī)誤差（變異）之間的差別，同樣采用F檢驗(yàn)，此時(shí)失擬檢驗(yàn)P應(yīng)>0.05。

殘差的正態(tài)性檢驗(yàn)：正態(tài)性才符合隨機(jī)誤差的特性。

綜上所述，標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn)應(yīng)該是線性檢驗(yàn)結(jié)合失擬檢驗(yàn)，以及殘差的正態(tài)性檢驗(yàn)結(jié)合，才是統(tǒng)計(jì)學(xué)上比較完備的。

五、標(biāo)準(zhǔn)曲線使用中的問(wèn)題

是否需要人為增加(0,0)點(diǎn)：通常不能人為增加(0,0)點(diǎn)，因?yàn)?管進(jìn)入儀器可能也有響應(yīng)值，這也是考察試劑空白的一個(gè)重要步驟。

是否需要減掉試劑空白：不需要。儀器測(cè)出來(lái)標(biāo)準(zhǔn)系列的響應(yīng)值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應(yīng)值來(lái)做，但在構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，已經(jīng)認(rèn)為該響應(yīng)值就是0濃度，即已經(jīng)扣除了空白。

含量計(jì)算方法：在使用標(biāo)準(zhǔn)曲線查含量時(shí)，可以先用樣品信號(hào)減空白信號(hào)，然后去標(biāo)準(zhǔn)曲線推算含量。這樣出來(lái)的含量不確定度要小一些。

總之，標(biāo)準(zhǔn)曲線是分析檢測(cè)中的重要工具，其制作、檢驗(yàn)和使用都需要嚴(yán)格遵守相關(guān)要求和規(guī)范，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。