標準曲線理論基礎知識

標準曲線在分析檢測中扮演著至關重要的角色，以下是關于標準曲線的基礎理論知識：

一、標準曲線的定義

分析檢測中的標準曲線是指一系列已知含量（濃度/量）的物質與儀器響應/信號之間的關系。數學上，這種關系可以通過曲線方程來表示；圖形上，則呈現為標準曲線。標準曲線的目的是可以根據標準曲線查出待測物質的含量。

二、標準曲線的制作要求

按GB/T 22554-2010《基于標準樣品的線性校準》推薦，制作標準曲線時，應遵循以下要求：

濃度范圍：標準曲線的濃度范圍應覆蓋正常操作條件下的被測量范圍。

組分一致性：標準樣品的組分應盡量與被測樣品組分一致，以減少基體干擾。

濃度分布：標準樣品的濃度值應等距離的分布在被測量范圍內，以確保曲線的準確性和可靠性。

標準樣品個數：標準樣品的個數至少應有3個濃度，通常建議更多，以提高擬合的準確性和可靠性。

重復性：每個標準點至少重復2次，這個重復是指從稀釋開始，以確保數據的穩定性和重復性。

三、標準曲線的核心問題

標準物質或標準品：需要找到確切濃度的標準物質或標準品。

基體匹配：標準系列和待測物質一定要有相同和一致的基體，以減少樣品基體對儀器響應的干擾。

四、標準曲線的檢驗

標準曲線的檢驗是實際操作中的難點，主要包括以下方面：

精密度檢驗：考察試驗點在擬合直線方程左右的分布情況，需用F檢驗，P<0.05作為線性檢驗合格的標準。

截距檢驗和斜率檢驗：分別考察Y=a+bX中a和b與0的統計學差異。a與0有差別說明有試劑空白或系統誤差，而b若與0無差別說明儀器的靈敏度達不到分析要求。

決定系數：是相關系數的平方，提示回歸方程所解釋X對Y變化占Y變量的比值。

失擬檢驗：看曲線擬合后剩下殘差與實驗數據本身隨機誤差（變異）之間的差別，同樣采用F檢驗，此時失擬檢驗P應>0.05。

殘差的正態性檢驗：正態性才符合隨機誤差的特性。

綜上所述，標準曲線的檢驗應該是線性檢驗結合失擬檢驗，以及殘差的正態性檢驗結合，才是統計學上比較完備的。

五、標準曲線使用中的問題

是否需要人為增加(0,0)點：通常不能人為增加(0,0)點，因為0管進入儀器可能也有響應值，這也是考察試劑空白的一個重要步驟。

是否需要減掉試劑空白：不需要。儀器測出來標準系列的響應值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應值來做，但在構建標準曲線時，已經認為該響應值就是0濃度，即已經扣除了空白。

含量計算方法：在使用標準曲線查含量時，可以先用樣品信號減空白信號，然后去標準曲線推算含量。這樣出來的含量不確定度要小一些。

總之，標準曲線是分析檢測中的重要工具，其制作、檢驗和使用都需要嚴格遵守相關要求和規范，以確保結果的準確性和可靠性。