手性柱正反相模式的切換方法需要謹慎操作，以確保色譜柱的性能和分離效果不受影響。以下是一個通用的切換步驟，但請注意，不同品牌和型號的手性柱可能有特定的切換要求，因此在實際操作中應參考色譜柱的說明書。
### 一、切換前的準備
1. **了解色譜柱特性**：
- 確認色譜柱是否支持正反相模式的切換。
- 了解色譜柱的耐受范圍，包括pH值、溶劑類型等。
2. **準備所需溶劑**：
- 準備異丙醇或其他過渡溶劑。
- 準備正相和反相流動相所需的溶劑。
3. **沖洗色譜系統**：
- 在切換之前，使用當前流動相沖洗色譜系統，包括色譜柱、進樣器、檢測器等部分，以確保系統清潔。
### 二、切換步驟
1. **降低系統壓力**：
- 在切換過程中，應盡量避免系統壓力突然升高，以免損壞色譜柱。
2. **使用過渡溶劑**：
- 將當前流動相逐漸替換為異丙醇或其他過渡溶劑。這一步是為了減少流動相切換時對手性固定相的沖擊。
- 過渡溶劑的流速應適當降低，以延長沖洗時間，確保充分過渡。
3. **切換流動相**：
- 當過渡溶劑完全替代當前流動相后，可以開始切換為正相或反相流動相。
- 切換時，應逐漸調整流動相的比例，避免突然改變。
4. **平衡色譜柱**：
- 在新的流動相下，讓色譜柱運行一段時間以進行平衡。平衡時間取決于色譜柱的類型和所需的分離效果。
5. **調整儀器參數**：
- 根據新的流動相和分離需求，調整儀器的參數，如流速、檢測波長等。
### 三、切換后的注意事項
1. **監測色譜柱性能**：
- 切換后，應密切監測色譜柱的性能，包括分離度、峰形等。
- 如發現性能下降或異常，應及時查找原因并采取相應措施。
2. **避免頻繁切換**：
- 頻繁切換正反相模式可能會對色譜柱造成損害。因此，在實際應用中，應盡量避免不必要的切換。
3. **記錄切換過程**：
- 記錄切換過程中的關鍵步驟和參數，以便在出現問題時能夠追溯原因。
### 四、特定品牌手性柱的切換要求
- 對于某些特定品牌的手性柱（如大賽璐、菲羅門等），可能需要遵循特定的切換步驟和要求。例如，大賽璐手性柱在正相和反相流動相之間進行切換時需要用異丙醇小流速的過渡，且壓力不能超過100bar。菲羅門Chiral N與M系列的正相與SFC用手性柱在正相和SFC分離模式之間切換時也必須用異丙醇過渡。
綜上所述，手性柱正反相模式的切換需要謹慎操作，并遵循特定的步驟和要求。在實際應用中，應參考色譜柱的說明書并密切監測色譜柱的性能。
