在HPLC（高效液相色譜）操作中，兩種典型的錯誤操作包括：
1. **對流動相進行不必要的過濾**：通常，經(jīng)過凈化系統(tǒng)處理得到的HPLC級溶劑和水已經(jīng)足夠干凈。如果再次進行額外的過濾，可能會引入不必要的化學(xué)污染。然而，當(dāng)使用離子對試劑、低純度緩沖劑或高鹽含量的流動相時，或者當(dāng)水源質(zhì)量不佳導(dǎo)致凈化系統(tǒng)流出的水不夠干凈時，仍需要對流動相進行過濾。
2. **使用不適當(dāng)?shù)纳V柱**：一種常見的錯誤是選擇粒徑為5μm的顆粒填充的色譜柱，盡管多年來這種規(guī)格的色譜柱一直作為標(biāo)準(zhǔn)使用。實際上，3μm粒徑顆粒填裝的色譜柱（150mm×4.6mm）具有更好的分離效果及更短的分析時間。然而，需要注意的是，3μm粒徑顆粒填裝的色譜柱的進口孔隙更小，更容易被“臟”的樣品堵塞。另外，盡管4.6mm內(nèi)徑的色譜柱長期以來一直作為HPLC分析柱的“標(biāo)準(zhǔn)”，但在努力減少溶劑消耗和節(jié)約樣品的目標(biāo)下，許多實驗室已經(jīng)開始轉(zhuǎn)向使用3.0mm內(nèi)徑的色譜柱。
為了避免這些錯誤，建議用戶在使用HPLC時仔細閱讀并遵循相關(guān)儀器和試劑的說明書，并根據(jù)實驗條件和需求進行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整和優(yōu)化。同時，定期對儀器進行維護和保養(yǎng)，確保其在最佳狀態(tài)下運行。
