液相色譜柱的平衡方法主要包括以下步驟：
1. 選擇合適的流動相：對于反相色譜柱，應選擇純乙腈或甲醇作為流動相，確保流動相和乙腈-水互溶。如果流動相中含有緩沖鹽，需先用20倍柱體積的5%的乙腈-水流動相進行“過渡”，然后使用分析樣品的流動相直至得到穩定的基線。
2. 低流速平衡：首先，用低流速0.2ml/min將色譜柱平衡過夜，這樣可以將色譜柱的填料充分平衡至較佳狀態，以保證色譜柱的使用壽命，并確保在以后的使用中獲得分析結果的重現性。
3. 升高流速：然后，將流速升高到0.8mL/min沖洗30分鐘，以便將色譜柱的填料充分平衡至最佳狀態，這樣可以保證色譜柱的使用壽命，并且保證在以后的使用中獲得分析結果的重現性。平衡過程中，將流速緩慢地提高直到獲得穩定的基線。
